Zapobieganie poprzetoczeniowej chorobie przeszczep przeciwko gospodarzowi (TA-GvHD)

Badania (in vitro i in vivo) oceniające stopień inaktywacji limfocytów T
przy zastosowaniu systemu Intercept

Metoda inaktywacji biologicznych czynników chorobotwórczych z chlorowodorkiem amotosalenu zastosowana w systemie Intercept jest drugą (po metodzie inaktywacji z ryboflawiną, zastosowaną w systemie Mirasol PRT) rutynowo stosowaną metodą, która skutecznie inaktywuje leukocyty. W próbkach inaktywowanych w systemie Intercept KKP zaobserwowano obniżenie liczby żywotnych limfocytów T o ponad 5,4 log (LDA) [14-16].

Dodatkowe badania wykazały wyjątkową wrażliwość limfocytów T na działanie metody z chlorowodorkiem amotosalenu (S-59). Związek S-59 w dawce 1500-3000 razy niższej niż rutynowo stosowana w systemie Intercept oraz przy dwukrotnie niższej dawce promieniowania UVA inaktywował limfocyty T do granicy oznaczalności. W przypadku promieniowania jonizującego gamma stwierdzono ograniczony margines bezpieczeństwa. Udowodniono, że już przy niewielkim obniżeniu dawki tego promieniowania efektywność inaktywacji limfocytów T ulegała gwałtownemu zmniejszeniu. Potwierdzeniem tych obserwacji było wystąpienie TA-GvHD u biorców, którzy otrzymywali składniki krwi napromieniane dawką 15 Gy (1500 cGy) [16, 17].

Natychmiastowe obniżenie ekspresji CD69 odpowiednio do 21% i 12% w próbkach KKP poddanych działaniu promieniowania jonizującego gamma i w próbkach poddanych inaktywacji w systemie Intercept (przy średniej ekspresji grupy kontrolnej – 82%) wskazuje na skuteczną inaktywację limfocytów w obu przypadkach [18, 19]. Inaktywację leukocytów potwierdzono także na poziomie molekularnym. Skuteczność fotomodyfikacji genomu DNA leukocytów zależy od stężenia S-59. Po zastosowaniu 150 µmol/l S-59 i 1,9 J/cm² UVA modyfikację DNA scharakteryzowano jako powstanie jednego związku addycyjnego przypadającego na 83 pary zasad (bp) DNA. Ten poziom modyfikacji DNA upośledza komórkowe mechanizmy naprawcze i jest w stanie zahamować ekspresję genu.

Mechanizm działania związków addycyjnych wyjaśnia m.in., dlaczego po zastosowaniu S-59 następuje całkowite zahamowanie syntezy IL-8 w leukocytach podczas przechowywania KKP. Efektywność fotomodyfikacji DNA po zastosowaniu promieniowania [...]

Ten materiał dostępny jest dla Subskrybentów.

Wybierz pakiet subskrypcji dla siebie i ciesz się dostępem do bazy merytorycznej wiedzy!

Wybierz subskrypcję

Masz aktywną Subskrypcję?

Zaloguj się

Nie masz jeszcze konta w serwisie? Dołącz do nas